光学显微镜的正确使用

目的要求 掌握光学显微镜的正确使用和维护

光学显微镜的结构、使用和维护 显微镜是组织胚胎学实习课的重要学习工具，每个医学生都必须熟悉它的主要结构和功能，使用时必须爱护，按正规的操作熟练地正确使用显微镜，以免损坏，保证实验课的顺利进行。 Ⅰ．显微镜的基本结构 各种类型的显微镜，其基本结构大致相似，可分为机械部分和光学部分。 机械部分 1、镜座、镜柱、镜臂，构成显微镜的支架。 2、镜筒：位于镜臂上方，上端装有目镜，下端连接物镜转换器。 3、物镜转换器：装在镜臂的末端，镜筒的下方，呈盘状，下面有3—4个物镜孔，可安装不同放大倍数的物镜。换用物镜时，可转动旋转盘。 4、载物台（镜台）：位于镜柱后方的方形平台，用于放置玻片标本。台中央有一通光孔，两侧有用以固定玻片标本的压片夹。载物台上装有切片推进器，可前后左右移动标本。 5、调焦手轮：能调节焦距，位于镜柱下方两侧，有粗调焦手轮（粗调）和细调焦手轮（细调）。粗调焦手轮可使载物台作较大距离和较快速度地升降，适合低倍镜对焦；细调焦手轮可使载物台缓慢升降，用作较精细的调节，适合高倍镜和油镜对焦。

Ⅱ.光学部分 1目镜：位于镜筒上端，刻有10×符号，表示其放大倍数。目镜镜筒内有一指针，用以指明视野中观察物像的部位，以利示范和提问。在目镜的下方有屈光度调节环，可通过调节屈光度来补偿左右眼的视力差。 2物镜：装在物镜转换器上，依放大倍数不同分为：放大镜，上面刻有4×，放大倍数为4倍；低倍镜，上面刻有10×，放大倍数为10倍；高倍镜，上面刻有40×，放大倍数为40倍；油镜，上面刻有100×，放大倍数为100倍。显微镜的总放大倍数等于目镜和物镜放大倍数的乘积。如：目镜头10×、物镜100×，其放大倍数为10×100 =1000倍 3聚光器：位于载物台通光孔下方，可使进入的光线集中于标本上，其一侧有聚光器垂直运动手柄，利用手柄可调节聚光器的垂直位置，上升时光线增强，下降时光线减弱。 4光阑：位于聚光器下方，拨动其上的聚光器孔径光阑调节杆，可使光圈扩大和缩小，以调节进光量。使用时将调节杆拨至与光路中的物镜倍率相同的数字。 本实验室显微镜为尼康YS100型，双目镜，电光源照明。在镜柱右側有电源开关，当开关转向I时，灯亮，转向0时，灯灭。在电源开关下方有亮度调节钮，顺时针旋转时，视场变亮，逆时针旋转时，视场变暗。

Ⅲ。显微镜的使用方法 使用时双手握住镜臂，轻放在自己座位左前方的实验台上，以离实验台边缘10厘米左右处为宜

（一）低倍镜的使用方法

1． 对光：首先打开电源开关，旋转亮度调节钮，灯泡发亮；转动粗调焦手轮，使载物台略升高；旋转物镜转换器，使低倍镜对准通光孔（可听见轻微的碰撞声）；打开光阑，将聚光器调至上端极限处，再稍下降；双眼对准目镜观察，再旋转亮度调节钮，直到视野内光线明亮均匀为止；调节两目镜间距，使左右眼视野重叠合一。

2．放片：取一张玻片标本，注意标本的位置和正反面，将有盖玻片的一面朝上，用片夹固定，然后转动推片器旋钮，将标本对准通光孔的中央。

3．调焦： 侧视低倍镜，旋转粗调焦手轮，将载物台提升至最高点。目镜观察，慢慢旋转粗调焦手轮，降低载物台，当视野中出现物像时，再用细调焦手轮调节，直到视野中物像清晰为止。 当左右眼存在视力差时，可通过调节屈光度来补偿，调节方法是左眼通过左目镜，转动左目镜上的屈光度调节环，对标本对焦；右眼通过右目镜，转动右目镜上的屈光度调节环，对标本对焦。

（二）高倍镜使用方法

1． 首先在低倍镜下找到物像，将需要放大观察的部分移至视野正中央，并调节清晰。

2． 侧视物镜，转换高倍镜。

3． 目镜观察，并慢慢转动细调焦手轮，即可见到清晰的物像。 （三）油镜的使用方法

1． 一定要在高倍镜下将拟用油镜观察的结构移到视野正中央，并调节清晰。

2． 开大光阑，旋转物镜转换器，将高倍镜移出光路。眼睛注视側面，在欲观察标本的部位滴上一滴香柏油，慢慢将油镜移入光路，使油镜面与油滴接触。

3． 从目镜观察，同时慢慢上下转动细调焦手轮，直至出现清晰的物像。油镜使用完毕后，必须用擦镜纸蘸少许二甲苯将标本、油镜头和其它可能有油迹的部分擦净（反复多擦几次）。

切片的观察，应按肉眼——低倍——高倍——油镜（必要时）

① 肉眼：了解标本的大小、形状、着色（染色方法）和肉眼可见的特殊标志等。

② 低倍：是识别组织和器官的组织结构及其特点的重要方法，低倍视野大，移动迅速，便于了解标本全貌。

③ 高倍和油镜：主要了解细胞水平的细微结构，应先经低倍选好目标后再用高倍镜和油镜观察。

Ⅳ。显微镜使用的注意事项 1．必须正确地移动和放置显微镜。 2．使用前要检查，如发现缺损或使用时损坏，应立即报告指导老师。 3．放置玻片标本时，应将有盖玻片的一面向上，否则使用高倍镜和油镜时将找不到物像，同时又容易损坏标本和镜头。 4．使用高倍镜和油镜时，只能旋转细调焦手轮，不能使用粗调焦手轮。 5．油镜使用后，务必将浸油擦净。镜头只能用擦镜纸擦拭。严禁用手指、手帕或手纸，以免磨损镜面。 6．不能在高倍镜和油镜下更换切片标本。 7．不得随意取出目镜或拆卸零部件，以防灰尘落入或丢失、损坏等。 8．显微镜使用完毕后，先将亮度调节钮调到最低，然后关闭显微镜电源。待冷却后，罩好显微镜防尘罩，并作好显微镜使用记录。

警示：无视此符号的提示，可能导致死亡或重伤！

使用过程中，灯泡及其周围可产生高热，因此在灯亮或熄灭后30分钟内不要触摸，以免烫伤！

（李季蓉）